히로시의 회상 다운로드

By 6 Febbraio 2020 Senza categoria

버전: 6.0 (변경 기록 페이지 참조) 날짜: 15 MB 에 대 한: 윈도우 10, 8, 7, 비스타, XP, 또는 서버 2003 통해 2019 (7 통해 10 또는 2008 64 비트 에디션에 대 한 2019) 마우스 두뇌 는 설치류 뇌 매트릭스를 사용 하 여 슬라이스 했다 (RBM-20; ASI 인스트루먼트, 워렌, MI, 미국). 등쪽 해마(-1.06~-2.06 mm 사이의 브레그마)를 슬라이스로부터 해부하고 -80°C에서 보관하였다. Ser845에서 인산화 GluA1의 수준을 분석하기 위해, 시냅스 막 분획은 불연속 자당 그라데이션22상에서 분리되었다. 프로테아제 억제제 혼합물을 함유하는 얼음-차가운 균질화 완충제(4 mM HEPES, pH 7.4; 320 mM 자당)에서 균질화된 뇌 조직(Complete; 로슈 진단). 균질화된 샘플을 4°C에서 500×g에서 2회 원심분리하여 2분 동안 핵 및 기타 이물질을 제거하였다. 상수체는 4°C에서 20,000×g에서 30분 동안 원심분리하였다. 펠릿은 SDS-폴리아크릴아미드 겔(SDS-PAGE) 로딩 버퍼에 부유하고 웨스턴 블로팅에 의해 분석되었다. BMAL1, Per2 및 Dbp의 발현 수준을 분석하기 위해, 뇌 조직을 SDS-PAGE 로딩 버퍼에서 균질화한 다음 4°C에서 15,000 ×g에서 30분 동안 원심분리하였다. 상수체는 서쪽 블로팅에 의해 분석되었다. 웨스턴 블로팅은 토끼 폴리클로날 항-GluA1 항체(AB1504, 1:1000)를 사용하여 수행되었다; 머크 밀리포어, 항글루아1 포스포-Ser845 항체(AB5849, 1:1000; 머크 밀리포어, 항-BMAL1 항체(NB100-2288, 1:1000; 노부스 생물학, 리틀턴, CO, 미국), 항-Per2 항체 (PER21-A, 1:1000; 알파 진단 인터내셔널, 샌 안토니오, 텍사스, 미국), 안티 Dbp 항체 (PM079, 1:1000; MBL), 또는 마우스 단일클론 항β-액틴 항체(A1978, 1:10,000; 시그마-알드리히)22,62. 양성 항체 결합은 면역스타 LD 시스템(와코, 일본)을 사용하여 가시화하였다. 치준측정 분석은 스캐닝 후 이미지 랩 소프트웨어(Bio-Rad)에 의해 수행되었다(ChemiDoc XRS+ 시스템, 바이오-라드).

GluA1의 인산화 수준은 Ser845에서 인산화 글루A1의 수준을 GluA1의 총량으로 정규화하여 계산하였다(상대 인-GluA1 [Ser845]/GluA1 수준). 각 실험은 독립적으로 적어도 3회 반복하였다. 잘라낸 이미지는 소스 데이터 파일에 표시됩니다. 무어, R. Y., 스페, J. C. 및 누출, R. K. Suprachiasmatic 핵 조직. 세포 조직 Res. 309, 89-98 (2002). Vazdarjanova, A.

외. 해마 및 신피질 신경 네트워크에서 효과기 즉각적인 초기 유전자 아크 및 호머 1a의 경험 의존적 일치 발현. J. 신경증. 22, 10067–10071 (2002). 페르난데스, F. 외. 다운 증후군의 마우스 모델에서 인지 장애에 대 한 약물 요법. 낫.

신경증. 10, 411–413 (2007). 마우스는 발충격이 전달될 수 있는 스테인리스 스틸 그리드 플로어가 장착된 컨디셔닝 챔버(17.5 cm × 17.5 cm × 15 cm)에서 훈련 및 테스트하였다28,45,46,48,63,66,67,688. 훈련은 마우스를 챔버에 배치하고 충격(2s duration, 0.4 mA)을 148초 후에 전달하는 것으로 구성되었다. 마우스는 충격 후 30s의 홈 케이지로 복귀하였다. 기억력은 트레이닝 컨텍스트(test)에서 교체되었을 때 5분 동안 동결된 시간의 백분율로 측정되었다. 동결 거동(호흡을 제외한 완전한 운동 부족으로 정의)은 다른 곳에서 설명된 대로 자동으로 측정되었다74(오하라 주식회사, 일본 도쿄). 워드로, S. M.

외. 코어 circadian 시계의 유전 중단 해 마 의존 메모리 손상. 배울. Mem. 21, 417–423 (2014). dnBMAL1 마우스에서 손상된 기억 회수에 대한 분자 메커니즘을 이해하기 위해, 우리는 해마의 RNA 시퀀싱 (RNA-seq)을 수행했습니다. 독창성 경로 분석 (IPA)는 dnBMAL1 마우스가 G 단백질 결합 수용체 신호에 있는 cAMP 중재한 신호 및 변경의 중요한 하향 조절을 전시한다는 것을 표시했습니다. 중요한 것은, cAMP 매개 시그널링에 대한 이러한 dnBMAL1 효과는 ZT4(도 5a)에 비해 ZT10에서 더 두드러졌다. 더욱이, 유전자 세트 농축 분석(GSEA)은 WT 마우스에 비해 ZT10에서 dnBMAL1 마우스에서의 circadian 리듬뿐만 아니라 cAMP 대사 과정의 조절의 유전자 발현 수준에서 현저한 감소를 밝혔다(도 1.